产品货号:
YT404
中文名称:
DNA末端平滑试剂盒
英文名称:
DNA Blunting Kit
产品规格:
20次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒是利用T4 DNA聚合酶的5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'的DNA外切酶活性,用于将酶切或PCR等反应后产生的粘末端转变为平末端的试剂盒。经过本试剂盒处理产生的平末端DNA片段可以用于常规的平端连接反应。
粘末端有两种,一种为5'端突出末端,另外一种为3'端突出末端。本试剂盒可以将5'端突出末端补平,也可以将3'端突出末端削平(也称打平)。
当末端为5'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其5'→3'DNA聚合酶活性将末端补平;当末端为3'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其3'→5'DNA外切酶活性将末端削平。
组分 | 规格 |
T4 DNA Polymerase(1U/μl) | 20μL |
5×Reaction Buffer | 100μL |
dNTP Mixture(2.5mM each) | 50μL |
保存:-20℃
5×Reaction Buffer:
335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT,84mM (NH4)2SO4。
- 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 参考如下表格设置反应体系:
成分 用量 5×Reaction Buffer 4μL dNTP Mixture(2.5mM each) 0.8μL DNA 1μg 无核酸酶的去离子水 至19μL T4 DNA Polymerase(1U/μl) 1μL - 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
- 11℃孵育20分钟,或室温(20~25℃)孵育5分钟。
- 70℃孵育10分钟终止反应。随后可直接用于连接反应或纯化后用于连接反应。如果不直接用于后续反应,可以在-20℃保存。
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